4.3.1 取出一次性培養(yǎng)器先檢查包裝是否無損，在無菌室內(nèi)打開無菌包裝。 
4.3.2 將一次性培養(yǎng)器逐個插放在不銹鋼排液槽上。 
4.3.3 將一次性培養(yǎng)器的彈性軟管裝入集菌儀的蠕動泵頭，要求定位準(zhǔn)確，軟管走勢順暢。 
4.3.4 用中間的針孔插到樣品瓶里，然后用尾端針孔插到稀釋液里，開機，將稀釋液倒置，把液體打入樣品瓶中，樣品瓶中液體加滿后，放下稀釋液，再倒置樣品瓶，使樣品通過培養(yǎng)器進行集菌。 
4.3.5 完成集菌后，開啟已滅菌好的培養(yǎng)基瓶，將前端針頭插入培養(yǎng)基中，稀釋液瓶中針孔不要拔出。 
4.3.6 摘下一次性培養(yǎng)器頂部空氣濾器開口的膠塞，套在一次性培養(yǎng)器的底口上， 
4.3.7 用夾子夾閉與一次性培養(yǎng)器連接部的軟管，留出5-6cm軟管，剪除其余部分，并將開口端插在空氣濾器的開口上。 
4.3.8 分別按照規(guī)定時間培養(yǎng)。 
4.3.9 觀察培養(yǎng)情況，若需取樣分離培養(yǎng)，可將軟管消毒，用無菌注射器插入軟管抽取所需；量做進一步檢查 。 
4.4 微生物限度檢測操作過程 
4.4.1 取濾膜（直徑50mm）N張，浸泡在純化水里約5分鐘。 
4.4.2 用鑷子取出濾膜，平帖在不銹鋼網(wǎng)面片放入不銹鋼底座里，放入墊片和0型圈，將螺蓋和杯體蓋緊組裝成一套完整的全封閉過濾培養(yǎng)器。 
4.4.3 滅菌，用牛皮紙將組裝好的培養(yǎng)器包好，放入高壓濕熱滅菌鍋里，121℃,0.1MPa進行滅菌。 
4.4.4 取滅菌好的培養(yǎng)器至微生物限度檢定室，進行集菌過濾。 
4.4.5 打開配制好的固體培養(yǎng)基，將集菌好的濾膜平帖在培養(yǎng)基上（濾膜上不可以有氣泡產(chǎn)生）。 
4.4.6 按照規(guī)定進行培養(yǎng)。 
4.5 注意事項 
4.5.1 在集菌儀泵頭合上之前（需扣緊蠕動泵東快），嚴(yán)禁啟動開關(guān)，否則將可能倒置手部受傷。 
4.5.2 若無菌室采用化學(xué)消毒劑消毒時，應(yīng)將儀器移至封閉罩內(nèi)，或搬出無菌室，以免損壞電子不見和儀器表面。 
4.5.3 應(yīng)保持取樣針上的過濾膜干燥，氣流暢通，正常進液。方法是在取樣針插入瓶裝流體樣品時，應(yīng)先開機，然后倒置容器瓶。 
4.5.4 若敬業(yè)管內(nèi)出現(xiàn)過多氣泡，應(yīng)將泵速降低，并檢查進氣濾膜是否被浸泡，若不能進液，則檢查進液針是否暢通。